為何使用標(biāo)記蛋白

標(biāo)記蛋白具有許多優(yōu)點(diǎn)。原則上，該方法為檢測(cè)各種細(xì)胞成分中感興趣的蛋白提供廠新的手段。①如果開放閱讀框已經(jīng)被克隆化，但是由于蛋白是新發(fā)現(xiàn)的，或者由于蛋白免疫原性較弱，目前尚沒有針對(duì)該蛋白產(chǎn)物的抗體時(shí)，此標(biāo)記技術(shù)具有重要的應(yīng)用價(jià)值。隨著基因組的研究，由基因工程進(jìn)入蛋白工程，標(biāo)記技術(shù)顯得越來越重要。②由于標(biāo)記物不是天然蛋白氨基酸序列的固有部分，與標(biāo)記物結(jié)合的試劑在進(jìn)行蛋白提純過程中，對(duì)蛋白功能產(chǎn)生影響的可能性較小。③只要具備適當(dāng)?shù)妮d體，標(biāo)記蛋白可在任何細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)；例如，相同的標(biāo)...

Real-Time PCR

所謂Real-TimePCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。real-timePCR技術(shù)即實(shí)時(shí)熒光定量PCR避免了傳統(tǒng)PCR以終產(chǎn)物監(jiān)測(cè)定量產(chǎn)生的偏差，提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。該技術(shù)已經(jīng)被廣泛用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因...

探秘云南轉(zhuǎn)基因克隆豬 神奇熒光助推人類醫(yī)學(xué)研究

摘要：云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院近日成功育成10頭攜帶綠色熒光蛋白和瘦素蛋白的轉(zhuǎn)基因克隆豬引起各界廣泛關(guān)注，2月3日記者在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)了解到，這一成果將有助于脂肪沉積以及人類肥胖病和糖尿病等疾病的研究，也將使轉(zhuǎn)基因克隆技術(shù)在功能基因驗(yàn)證、疾病模型、異種器官移植等領(lǐng)域的應(yīng)用前景更為廣闊。云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院近日成功育成10頭攜帶綠色熒光蛋白和瘦素蛋白的轉(zhuǎn)基因克隆豬引起各界廣泛關(guān)注，2月3日記者在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)了解到，這一成果將有助于脂肪沉積以及人類肥胖病和糖尿病等疾病的...